引起母豬發生流產的原因較多,特別是近些年一部分新的病毒性傳染病的發生和流行,使診斷工作更為復雜。也就是說,病原性和非病原性的原因都可引起豬發生流產。
就布魯氏菌病來說,流行病學、癥狀及剖檢變化還是可以作為診斷的依據。但要確診,必須有賴于實驗室細菌學、血清學的檢驗,特別是本病多呈隱性感染,只有反復多次檢驗,方可達到早期診斷的目的。
一、豬布魯氏茵病的特征
臨診上母豬的流產、公豬睪丸和附睪的炎癥、流產胎兒狀態,以及胎兒、胎衣及子宮、公豬睪丸的病理變化等都可作為初步診斷的依據。
二、細菌學檢查
1、病料抹片、染色、鏡檢
流產胎兒、胎衣、分泌物中常有大量細菌,采集胎衣分泌物、流產胎兒的胃內容物、脾、肝、淋巴結、子宮壞死部分等組織做抹片,用革蘭氏染色法染色見到革蘭氏陰性菌,用柯茲洛夫斯基染色法染色,??梢姷奖蝗境傻t色的小球桿狀菌,其他細菌或組織呈綠色。
2、分離培養
采取病料接種于10%馬血清的馬丁瓊脂斜面。如病料有雜菌污染時,可用選擇培養基培養。即是在100mL馬丁瓊脂或肝湯瓊脂中,加人2500IU桿菌肽、10mg放線菌酮、600IU多黏菌素B,混合后倒人平皿中,供分離培養用。 imuyi.com
接種病料后,37℃培養,每3天觀察一次。如有細菌生長,挑選可疑的菌落做細菌鑒定,如抹片、染色、鏡檢。將疑似菌落進行純培養,進一步做布魯氏菌生物學特性檢驗,用抗血清做玻片凝集試驗等。
3、動物接種
無菌取胎兒脾、肝、胃內容物,加生理鹽水磨碎,取兩只體重350~400g的豚鼠,腹腔或皮下注射1~2mL。接種前采血做布魯氏菌凝集反應檢查,接種后從第2周開始,每隔7~10天采血一次,做布魯氏菌凝集反應,觀察凝集反應滴度是否升高,若接種后凝集反應血清滴度達到1:5~1:10或更高時,即為陽性。同時撲殺豚鼠,可見淋巴結腫大,肝、脾腫大,并有灰白色細小的壞死結節。
取脾、肝和淋巴結做細菌分離培養,若分離培養有可疑菌落,則用已知布魯氏菌陽性血清做凝集反應,凝集反應為陽性,則可確定為布魯氏菌。若血清滴度達到1:5~1:10或更高,即使分離不出布魯氏菌,也可診斷為布魯氏菌病。
若接種動物臨診上不發病,剖檢也無病變,細菌分離培養陰性,凝集反應陰性時可判為陰性。
4、血清學凝集反應
血清學診斷最具有實際意義。一般是細菌侵入機體后,經7~15天血液中就出現凝集抗體,隨后凝集滴度逐漸增高。病畜流產后10天以上,大多數血凝滴度升高,陽性反應可保持幾個月甚至2~3年以上。
因此,流產后采血時間要在7~10天以后為好。目前,廣泛采用凝集反應,常用的有血清玻板凝集反應和血清試管凝集反應。具體操作方法及判定按農業部頒發的操作規程進行。
5、其他方法
補體結合反應:病畜感染后7~14天,血液中出現補體結合抗體,保持時間比凝集素要長,特異性和敏感性也高,對布魯氏菌病診斷有特殊的診斷價值。
但由于此法操作復雜,一般實驗室不做此項檢查。近年來,還用間接紅細胞凝集試驗、間接碳凝集試驗、抗球蛋白試驗、酶聯免疫吸附試驗、熒光抗體法、DNA探針、PCR等檢驗本病。
6、鑒別診斷
豬布魯氏菌病要與豬細小病毒感染、豬繁殖和呼吸障礙綜合征、豬偽狂犬病、豬乙型腦炎、豬衣原體病、豬瘟、豬鉤端螺旋體病、豬弓形蟲病等引起的流產相區別。